Detalhes bibliográficos
| Ano de defesa: |
2021 |
| Autor(a) principal: |
Silva, Renato Felix Da |
| Orientador(a): |
Não Informado pela instituição |
| Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
| Tipo de documento: |
Tese
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| Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
| Idioma: |
por |
| Instituição de defesa: |
Universidade Estadual do Ceará
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Não Informado pela instituição
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| Link de acesso: |
https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=104380
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Resumo: |
Os objetivos do presente estudo foram: 1) avaliar os efeitos do etanol e do FSH sobre o desenvolvimento folicular, secreção de esteroides, expressão de mRNA (BAX, BCL2, AQP3, CX43, INHBA, HSD3B, KITLG, HSPA1A, CYP19A1 e FSHR), retomada da meiose e perfil metabólico de folículos secundários ovinos isolados cultivados in vitro por 18 dias (Fase 1); 2) investigar o efeito da adição de eugenol (10, 20 e 40 μM), ácido ascórbico (50 μg/mL) e anetol (300 μg/mL) sobre a sobrevivência, ativação, diâmetro folicular e oocitário, produção de espécies reativas de oxigênio, capacidade antioxidante do meio após o cultivo in vitro por 7 dias de folículos pré-antrais caprinos inclusos no tecido ovariano (in situ) (Fase 2 - etapa 1); comparar a imunomarcação de calreticulina, trimetilação da histona (H3K4me3) e expressão de mRNA (CAT, KDM1AX1, KDM3A e ERP29) entre os tratamentos controle, Eugenol na concentração 40 μM (melhor concentração de eugenol obtida na etapa anterior), ácido ascórbico e anetol (Fase 2 - etapa 2). Para o cultivo na forma isolada, os folículos ovarianos foram cultivados por 18 dias nos seguintes tratamentos: α-MEM+ (controle cultivado), α-MEM+ suplementado com 100 ng/mL de rbFSH (FSH recombinante bovino) ou 0.2%-v/v de Etanol (AL). Para o cultivo in situ, fragmentos ovarianos foram fixados imediatamente (tratamento controle não cultivado) ou distribuídos aleatoriamente e cultivados por 1 ou 7 dias nos seguintes tratamentos: α-MEM+ (controle cultivado), α-MEM+ suplementado com 50 μg/mL de ácido ascórbico (AA), ou com 300 μg/mL de anetol (ANE 300), ou diferentes concentrações de eugenol a 10 (EUG 10), 20 (EUG 20) ou 40 μM (EUG 40). Os resultados da fase 1 demonstraram que o tratamento AL obteve uma maior produção de estradiol (P <0,05), maior percentagem de retomada da meiose (P = 0,057) e maiores níveis de RNAm para CYP19A1 e FSHR em relação ao controle. No tocante ao perfil metabólico, os níveis de alguns íons, que são provavelmente, aminoácidos, lipídios, um análogo do GMPc e um derivado do metabolismo do fosfoinositol, foram maiores (P<0,05) nos tratamentos AL e FSH do que no controle. Os resultados da fase 2-etapa 1 (cultivo in situ) demonstraram que, em geral, o EUG 40 melhorou a sobrevivência, ativação e crescimento folicular e oocitário em relação aos demais tratamentos testados (P<0,05). Já na fase 2-etapa 2, esse tratamento resultou em maiores taxas de viabilidade, reduziu a produção de ROS, aumentou a capacidade antioxidante do meio, reduziu a trimetilação da histona 3, aumentou a produção de calreticulina, a expressão de RNAm das KDMs e de ERP29 em relação ao meio controle. Em conclusão, o etanol aumentou a produção de estradiol e a retomada da meiose, bem como apresentou um perfil metabólico diferente do grupo controle após cultivo in vitro folículos pré-antrais ovinos isolados (fase 1). Além disso, a adição de eugenol na concentração de 40 μM melhorou de forma eficiente a sobrevivência e o desenvolvimento de folículos pré-antrais caprinos cultivados in vitro e reduziu a produção de EROs (fase 2). |
