Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: |
2020 |
Autor(a) principal: |
Oliveira, Mariana Cavalcante Theophilo Gaspar De |
Orientador(a): |
Não Informado pela instituição |
Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
Tipo de documento: |
Dissertação
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Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
Idioma: |
por |
Instituição de defesa: |
Universidade Estadual do Ceará
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Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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Departamento: |
Não Informado pela instituição
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País: |
Não Informado pela instituição
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Palavras-chave em Português: |
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Link de acesso: |
https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=95907
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Resumo: |
<div style="text-align: justify;"><span style="font-size: 10pt;">Vesículas extracelulares (VE) são estruturas membranosas envolvidas no processo de comunicação intercelular. Os exossomos são as menores VE, medindo em torno de 30-150 nm de diâmetro e sua principal função é o transporte de proteínas, ácidos nucléicos e lipídeos entre as células. Pesquisas utilizando exossomos como veículo alternativo para o transporte e entrega de compostos bioativos são cada vez mais frequentes, em virtude das vantagens que apresentam, como tamanho reduzido, ampla distribuição no organismo e capacidade de burlar o sistema imune. O leite de mamíferos é uma das principais fontes para a extração de exossomos, devido a fatores como baixo custo, ausência de toxicidade, boa biodisponibilidade e fácil método de obtenção. Nesse sentido, o objetivo desse estudo foi isolar os exossomos provenientes de leite de cabra (LC) e do leite de vaca (LV) para comparar a biodisponibilidade, tamanho e capacidade de encapsulamento de compostos bioativos, bem como o transporte e a entrega de uma molécula para as células. Para isso, os exossomos foram purificados por meio de ultracentrifugação diferencial, caracterizados morfologicamente por microscopia eletrônica, avaliados em relação a capacidade de encapsulamento utilizando a albumina de Moringa oleifera, Mo-CBP3 (Moringa oleifera - Chitin binding protein) conjugada com FITC, e, por fim, empregados em ensaios celulares. Foram testadas quatro metodologias de encapsulamento: eletroporação, sonicação, incubação à temperatura ambiente e choque térmico. Nossos resultados mostraram que os exossomos do LV são quase 30% maiores que os LC. O conteúdo proteico próprio das amostras de LV e LC foi de 36,6 e 30 mg/mL de proteína, respectivamente. A capacidade de encapsulamento de proteína pelos exossomos foi confirmada por meio de SDSPAGE, Western Blotting e espectofotometria de fluorescência. Os experimentos de incubação em cultivo celular confirmaram também entrega destas nanopartículas às células. Palavras-chave: Vesícula extracelular. Nanotecnologia. Entrega de moléculas.</span></div> |