EFEITO DO HORMÔNIO DE CRESCIMENTO (GH) E DO FATOR DECRESCIMENTO SEMELHANTE À INSULINA I (IGF-I) NO DESENVOLVIMENTO IN VITRO DE FOLÍCULOS PRÉ-ANTRAIS E PERFIL DE EXPRESSÃO GÊNICA EM FOLÍCULOS SECUNDÁRIOS E ANTRAIS INICIAIS EM CAPRINOS

• Ano de defesa: 2012
• Autor(a) principal: PADILHA, DEBORAH DE MELO MAGALHÃES
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Ciências veterinárias
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=91365

Os experimentos desta tese objetivaram avaliar: 1) o papel do IGF-I (Fase I) e do GH (Fase II), <br/>associados ou não ao FSH, em meio sequencial, sobre a sobrevivência, ativação e crescimento de <br/>folículos pré-antrais caprinos cultivados in situ, bem como expressão de RNAm para IGF-IR e <br/>FSHR em tecido cortical ovariano antes e após o cultivo in vitro (Fase I); 2) o efeito de diferentes <br/>intervalos de troca de meio de cultivo sobre a viabilidade e o desenvolvimento de folículos pré-<br/>antrais isolados de caprinos e ovinos (Fase III); 3) os efeitos do IGF-I (Fase IV) e do GH (Fase <br/>V), associados ao FSH, sobre a sobrevivência, formação de antro, crescimento in vitro de <br/>folículos secundários caprinos isolados, retomada da meiose de seus oócitos e a produção de <br/>embriões; 4) o perfil de expressão gênica de folículos secundários e terciários, através da técnica <br/>de microarranjo de DNA (Fase VI). Para o cultivo in situ (Fases I e II), fragmentos ovarianos <br/>foram cultivados por 16 dias e analisados por histologia, microscopia eletrônica de transmissão, <br/>microscopia de fluorescência e Azul de Trypan, sendo os folículos mensurados e classificados em <br/>primordiais, primários e secundários, bem como em normais ou degenerados. Quanto ao cultivo <br/>de folículos isolados, na Fase III, folículos secundários de cabras e ovelhas foram <br/>individualmente cultivados por 24 dias utilizando dois intervalos de troca de meio (dois ou seis <br/>dias). Nas Fases IV e V, folículos caprinos foram cultivados por 18 dias em diferentes <br/>concentrações de IGF-I (50 ou 100 ng/ml) ou GH (10 ou 50 ng/ml), na presença de FSH. Após 16 <br/>dias de cultivo in situ, observou-se que a associação de IGF-I e FSH durante todo o período de <br/>cultivo, bem como o meio sequencial contendo FSH até o dia 8 e GH do dia 8 ao dia 16 manteve <br/>a integridade ultraestrutural e a expressão de RNAm para FSHR, induziu a ativação, o <br/>crescimento folicular e a formação de folículos secundários. Na Fase III, para a espécie caprina e <br/>ovina, um maior percentual de folículos viáveis, taxa de formação de antro e oócitos destinados à <br/>MIV foram observados na troca de meio de cultivo a cada 2 e 6 dias, respectivamente. Nas Fases <br/>IV e V, a adição de IGF-I e GH ao cultivo promoveu a sobrevivência e melhorou a formação de <br/>antro, crescimento oocitário e retomada da meiose. Além disso, o GH resultou na produção de <br/>um embrião. A análise de microarranjo mostrou que existem importantes genes que são <br/>específicos para cada categoria folicular estudada (folículos secundários e terciários). Em <br/>conclusão, para caprinos e ovinos recomenda-se que o intervalo de troca de meio seja a cada 2 <br/><br/>&nbsp;<br/><br/><br/>9 <br/><br/>&nbsp;<br/><br/>dias e 6 dias, respectivamente. A utilização de FSH e GH de forma sequencial e a associação de <br/>IGF-I e FSH em cultivo in situ, bem como a adição de IGF-I e GH em cultivo de folículos <br/>secundários isolados, promoveu a manutenção da sobrevivência e o desenvolvimento folicular, <br/>com o GH proporcionando a produção embrionária. O perfil de expressão gênica diferiu entre <br/>folículos secundários e terciários. &nbsp;<br/><br/>&nbsp;<br/><br/>Palavras-chave: IGF-I. GH. Folículos pré-antrais. Cultivo in vitro. Perfil de expressão gênica. <br/><br/>&nbsp;<br/><br/>&nbsp;