RESFRIAMENTO DE EMBRIÕES DE Macrobrachium amazonicum EM ESTÁDIO FINAL DE DESENVOLVIMENTO

• Ano de defesa: 2018
• Autor(a) principal: FERREIRA, ARTHUR VINÍCIUS LOURENÇO
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Ciências veterinárias
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=89333

<font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">A utilização da técnica de resfriamento como ferramenta biotecnológica na área de aquicultura ainda carece de estudos a fim de verificar a viabilidade de sua aplicação, principalmente para espécies de invertebrados de interesse comercial. Assim, o presente trabalho teve como objetivo investigar os efeitos do resfriamento em embriões de Macrobrachim amazonicum em estádio final de desenvolvimento. Para tanto foram realizados pools de embriões coletados de fêmeas de camarão-da-amazônia, e realizados os seguintes grupos de tratamento: dimetilsulfóxido (DMSO) 3% + sacarose (SAC) 2M; etilenoglicol (EG) 0,5% + SAC 2M. Estes foram submetidos diretamente a temperatura de 2 ºC por 2 e 6 h de estocagem, e após período de resfriamento, foram lavados e levados a incubadoras por 24h. Os embriões foram fotografados antes, após resfriamento e após 24h nas incubadoras, para verificação de volume embrionário e sobrevivência. A partir de outro pool de embriões, foram realizados os seguintes grupos de tratamento: DMSO 3% + SAC 1M; EG 0,5% + SAC 1M. Estes foram submetidos a curva de resfriamento direta, 1ºC/min e 0,5ºC/min, até atingirem a temperatura de 2ºC por 2h. Em seguida, foram lavados e levados a incubadoras por 24h. A sobrevivência foi verificada após a estocagem de 2h e após 24h nas incubadoras. Amostras de embriões resfriados com DMSO 3% + SAC 2M e EG 0,5% + SAC 2M, submetidos a curva de resfriamento de 0,5º/min, foram fixadas e pós-fixadas para realização de microscopia eletrônica de varredura (MEV) com e sem a utilização de secadora de ponto crítico. A análise de sobrevivência e as fotografias para verificação de volume embrionário foram realizadas em microscópio estereoscópico Leica DFC 295 acoplado a equipamento de fotomicrografia no programa LAS V3.6. Os dados de sobrevivência e de volume embrionário foram submetidos análise de variância (ANOVA) e teste de Tukey, com nível de significância de 5%. Embriões tratados com DMSO 3% e EG 0,5% associados com SAC 2M, apresentaram sobrevivência de 84,8 ± 3,9 e 79,7 ± 2,8%, respectivamente. Após 24 h, estas taxas reduziram para 71,7 ± 6,6% e 66 ± 6.9%, respectivamente. Não foi observada diferença estatística significativa nos tratamentos quanto ao volume embrionário, mas foi possível observar mudança na transparência dos embriões para uma coloração esbranquiçada opaca ou marrom. Foi possível verificar taxas de sobrevivência de 83,3 ± 4% e 81,1 ± 3,3% para os grupos tratados em curva direta com DMSO 3%+ SAC 1M and EG 0,5% + SAC 1M, respectivamente. Os embriões analisados em MEV, sem utilização de secadora de ponto crítico, apresentaram intenso enrugamento na&nbsp;membrana coriônica, mas sem rompimento. Nos embriões analisados com secadora de ponto crítico foi possível observar que a membrana coriônica embora destruída na maioria das amostras, não apresentou enrugamento. Assim, pode-se constatar que a sobrevivência é inversamente proporcional ao tempo de estocagem, e a mudança na coloração observada está relacionada a formação de cristais de gelo. Em futuros experimentos devem-se avaliar soluções de descongelamento, novos protocolos para MEV a fim de testar a viabilidade de embriões e de larvas desta espécie para criopreservação.</span></font><div><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Palavras-chave: Embriões de camarão-da-amazônia. Injúrias. Ultraestrutura. Dimetilsulfóxido. Etilenoglicol.</span></font></div>