Detalhes bibliográficos
| Ano de defesa: |
2021 |
| Autor(a) principal: |
Silva, Samara Bryda Da |
| Orientador(a): |
Não Informado pela instituição |
| Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
| Tipo de documento: |
Dissertação
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| Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
| Idioma: |
por |
| Instituição de defesa: |
Universidade Estadual do Ceará
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Não Informado pela instituição
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| Link de acesso: |
https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=102082
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Resumo: |
A biodiversidade animal vem diminuindo como reflexo da excessiva exploração dos recursos naturais. Dentre esses animais, os cervídeos apresentam um número considerável de espécies inclusas, sendo o veado-catingueiro (Mazama gouazoubira) uma espécie vulnerável. Como instrumento para conservar espécies ameaçadas, é possível utilizar as biotécnicas reprodutivas, como a transferência nuclear de células somáticas interespecífica (TNCSi). Portanto, esse trabalho teve como objetivo comparar a expressão gênica de embriões clones intraespecíficos (bovino-bovino), interespecíficos (cervídeo-bovino) e embriões bovinos oriundos de fecundação in vitro (FIV). O cultivo celular (fibroblasto) foi realizado de 7-14 dias a partir de amostras criopreservadas de pele de veado-catingueiro e de bovino já existentes no laboratório. Posteriormente, oócitos bovinos foram maturados, desnudados, e utilizados na reconstrução embrionária nos grupos (citoplasto/carioplasto): cervídeo/bovino e bovino/bovino e posteriormente ativados. Os embriões reconstruídos juntamente com os oriundos de FIV, utilizados como grupo controle, foram mantidos a -80º C até avaliação da expressão gênica. Os genes OCT4, T-FAM, GJA1, BAX e BCL2, relacionados à qualidade embrionária, foram análisados por PCR em tempo real tendo como referência os genes, GAPDH, B-ACTINA e 16S. Para análise estatística, a quantificação relativa da expressão dos genes foi realizada utilizando o método 2-ΔΔCt. Os perfis de expressão foram apresentados como média (± desvio padrão) da quantificação relativa de mRNA e avaliados pelo teste de Kruskal-Wallis ou Mann-Whitney, quando conveniente, considerando um nível de significância de 5%. Não houve diferença (p > 0,05) no desenvolvimento embrionário entre intraTNCS e interTNCS (72,8% e 65,5% de taxa de clivagem, 38,7% e 43,2% de taxa de mórula e 11,3% e 5,9% de taxa de blastocistos, respectivamente). Ao analisar a expressão do gene OCT4, observou-se diferença (p < 0,05) nos grupos intraTNCS e inter TNCS quando comparados com o grupo FIV. A expressão do T-FAM no grupo intraTNCS obteve uma expressão significativamente maior quando comparado com o grupo FIV (p <0,05). No entanto, essa diferença não foi observada entre os grupos FIV e interTNCS, assim como os grupos intraTNCS e interTNCS (p >0,05). A expressão do gene GJA1 foi estatisticamente semelhante (p > 0,05) em todos os grupos experimentais. O gene BAX obteve uma expressão estatisticamente diferente entre todos os grupos, sendo mais expresso no grupo intraTNCS (p <0,05). Por sua vez, o gene BCL2 obteve uma expressão próxima de valores nulos em todos os grupos. A partir dos resultados obtidos conclui-se que a diferença observada na expressão de alguns genes nos embriões cervídeo-bovino não interferiu no desenvolvimento, sendo possível afirmar que os citoplastos bovinos são capazes de reprogramar os carioplastos do veado-catingueiro. Cabe frisar que, apesar dessa reprogramação é interessante a realização de estudos que avaliem a reprogramação epigenética nesses embriões. Essa pesquisa ajudará a elucidar os mecanismos envolvidos na interação núcleo-citoplasma e que resultam na ativação ou inativação de genes importantes para o desenvolvimento embrionário e formação de indivíduos. |
