EFEITO DO FATOR DE CRESCIMENTO DO NERVO (NGF), FATOR DE CRESCIMENTO DE FIBROBLASTO-10 (FGF-10) E INSULINA SOBRE O DESENVOLVIMENTO IN VITRO DE FOLÍCULOS PRÉ-ANTRAIS CAPRINOS

• Ano de defesa: 2011
• Autor(a) principal: CHAVES, ROBERTA NOGUEIRA
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Caprinos
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=92195

<div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Os objetivos deste estudo foram: 1) avaliar o efeito da adição de diferentes concentrações do</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">fator de crescimento do nervo (NGF), fator de crescimento de fibroblasto-10 (FGF-10) e</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">insulina na sobrevivência, ativação e crescimento in vitro de folículos pré-antrais caprinos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">cultivados inclusos em fragmentos de tecido ovariano, e 2) investigar os efeitos da insulina</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">sozinha ou em combinação com o hormônio folículo estimulante (FSH) sobre a sobrevivência,</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">formação de antro, crescimento folicular e competência para a retomada da meiose de oócitos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">oriundos de folículos secundários caprinos isolados e crescidos in vitro, bem como avaliar os</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">níveis de secreção de estradiol e RNAm para os receptores de FSH (FSHR), insulina (INSR) e</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">aromatase P450 (P-450AROM) em folículos caprinos cultivados in vitro através da técnica de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">ensaio imunoenzimático e RT-PCR em tempo real, respectivamente. Para o cultivo in situ,</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">fragmentos de córtex ovariano foram cultivados in vitro por um ou sete dias em &#945;-MEM+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">sozinho ou adicionado de diferentes concentrações de NGF e de FGF-10 (1, 10, 50, 100 ou 200</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">ng/mL), bem como de insulina (5, 10 ng/mL e 5, 10 &#956;g/mL). Antes e após cultivo, os</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">fragmentos foram analisados por histologia, microscopia eletrônica de transmissão e</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">microscopia de fluorescência, e os folículos foram classificados de acordo com o estádio de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">desenvolvimento (primordiais, transição, primários e secundários), bem como em normais ou</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">atrésicos. Além disso, os diâmetros oocitário e folicular também foram avaliados. Com relação</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">ao cultivo de folículos isolados, folículos secundários avançados foram microdissecados e</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">cultivados por 18 dias em &#945;-MEM+ suplementado com diferentes concentrações (5, 10 ng/mL e</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">10 &#956;g/mL) de insulina contendo ou não FSH adicionado de maneira sequencial. Para os</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">experimentos in situ, os resultados mostraram que após sete dias de cultivo, 1 ng/mL de NGF</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">promoveu a manutenção da ultraestrutura folicular. A adição de 50 ng/mL de FGF-10 ao meio</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">manteve a viabilidade e promoveu o crescimento folicular in vitro. Além disso, a utilização de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">10 ng/mL de insulina promoveu a sobrevivência, a ativação e o crescimento folicular e</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">oocitário. Após o cultivo dos folículos isolados, observou-se que 10 ng/mL de insulina em</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">combinação com FSH foi mais eficiente na promoção de retomada da meiose de oócitos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">oriundos de folículos pré-antrais, além de manter a sobrevivência, estimular o crescimento</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">folicular e aumentar a expressão de RNAm para INSR e P-450AROM e a secreção de estradiol.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Em conclusão, os resultados deste estudo mostraram que a utilização de NGF (1 ng/mL), FGF-</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">10 (50 ng/mL) e insulina (10 ng/mL) promove a manutenção da sobrevivência folicular e/ou o</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">desenvolvimento dos folículos pré-antrais caprinos. Além disso, a associação de insulina e FSH</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">assegurou o crescimento de folículos secundários caprinos, aumentaram os níveis de RNAm</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">11</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">para INSR e P-450AROM, bem como a secreção de estradiol em folículos ovarianos caprinos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">cultivados.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Palavras-chave: NGF. FGF-10. Insulina. Oócito. Cabra.</span></font></div>