ESTRATÉGIAS PARA MAXIMIZAÇÃO OU PRESERVAÇÃO DO POTENCIAL REPRODUTIVO DE FÊMEAS: DAS CÉLULAS-TRONCO GERMINATIVAS AOS FOLÍCULOS PRÉ-ANTRAIS

• Ano de defesa: 2013
• Autor(a) principal: FAUSTINO, LUCIANA ROCHA
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Reprodução animal
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=82221

<div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">RESUMO</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Estratégias para a maximização do potencial reprodutivo de fêmeas, bem como para a preservação de seus gametas são pontos chaves para as técnicas de Reprodução Assistida. Dessa forma, os objetivos deste trabalho foram caracterizar células-tronco germinativas femininas (OSC, oogonial stem cell) isoladas de ovários de camundongas senis (Fase 1), investigar a expressão e o efeito da adição do fator de crescimento queratinócito (KGF) em ovários caprinos (Fase 2), avaliar o efeito da interação entre o KGF e o kit ligant (KL) na foliculogênese inicial de cabras (Fase 3) e verificar os efeitos da vitrificação de tecido ovariano caprino sobre a integridade do DNA de oócitos inclusos em folículos pré-antrais (Fase 4). Na Fase 1, o número de OSC viáveis em ovários de camundongas com 3 e 20 meses foi similar. Após cultivo, oócitos foram gerados espontaneamente após a expansão das OSC de camundongas senis. Na Fase 2, após 7 dias de cultivo in vitro, a adição de KGF (1, 10, 50, 100 ng/mL) reduziu a porcentagem de folículos normais comparados com o controle não-cultivado (P&lt;0,05), no entanto, essa percentagem não deferiu do controle cultivado (P&gt;0,05). Após 1 ou 7 dias de cultivo, a porcentagem de folículos em crescimento aumentou em todos os tratamentos quando comparada ao controle não-cultivado (P&lt;0,05). A ultraestrutura folicular foi preservada após 7 dias de cultivo em 1 ng/mL de KGF e sua expressão foi observada em todas as categorias foliculares, bem como em células da teca e do estroma. Ao avaliar a interação entre KGF e KL (Fase 3), foi observado que o cultivo reduziu a porcentagem de folículos morfologicamente normais e viáveis comparados com o controle não-cultivado (P&lt;0,05). Em adição, uma maior porcentagem de folículos em crescimento e de folículos com maior diâmetro foi observada quando o KL foi adicionado sozinho ao meio de cultivo comparado com o controle cultivado (P&lt;0,05). Ao verificar os efeitos da vitrificação de tecido ovariano sobre a integridade do DNA oocitário (Fase 4), uma menor porcentagem de folículos morfologicamente normais foi observada no tratamento vitrificação seguida de cultivo (P&lt;0,05). A presença de dano na dupla fita de DNA, indicada pela &#947;-H2AX, foi observada em poucos oócitos e algumas células do estroma do ovário. Folículos com fragmentação do DNA foram encontrados em todos os grupos, porém sem diferenças significativas entre os tratamentos (P&gt;0,05). Em conclusão, ovários de camundongas senis mantêm OSC que podem formar oócitos após cultivo in vitro, podendo ser uma grande perspectiva para animais de produção de grande valor genético, como fêmeas caprinas. A adição de baixa concentração de KGF, amplamente distribuída nos diferentes compartimentos dos ovários, ao cultivo in vitro de tecido ovariano caprino mantém a ultraestrutura folicular</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">após 7 dias de cultivo. Em nossas condições de cultivo, não foi possível observar a interação do sistema KGF-1/KL na foliculogênese inicial de cabras. O protocolo de vitrificação do tecido ovariano utilizado neste estudo não aumentou o dano no DNA de oócitos inclusos em folículos pré-antrais.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Palavras-chave: Células-tronco germinativas. Folículos pré-antrais. Cultivo in vitro Criopreservação.</span></font></div>