UTILIZAÇÃO DA BIOTÉCNICA DE MANIPULAÇÃO DE OÓCITOS INCLUSOS EM FOLÍCULOS PRÉ-ANTRAIS PARA A AVALIAÇÃO IN VITRO DO POTENCIAL DE ANTICORPOS ANTI-ZONA PELÚCIDA PARA A IMUNOESTERILIZAÇÃO DE CADELAS

• Ano de defesa: 2008
• Autor(a) principal: LOPES, CLÁUDIO AFONSO PINHO
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Anticorpo
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=92494

<div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial de anticorpos anti-zona pelúcida para a</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">imunoesterilização de cães, através da análise da capacidade de antisoro produzido por</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">imunização de coelhos com zona pelúcida porcina (pZP) de promover a atresia de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">folículos pré-antrais (FOPA). Para este propósito, utilizou-se a biotécnica de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">manipulação de oócitos inclusos em folículos pré-antrais para se estabelecer um modelo</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">experimental in vitro, compreendendo métodos de preservação e cultivo in vitro de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">FOPA caninos. Na Fase I, avaliaram-se os efeitos da temperatura (4, 20 ou 38°C), meio</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">(salina fisiológica ou Meio Essencial Mínimo – MEM) e tempo (2, 6, 12 ou 24 h) de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">armazenamento sobre a morfologia e viabilidade folicular. As técnicas de histologia</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">clássica e microscopia eletrônica de transmissão, e a análise de viabilidade utilizando-se</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Azul de Tripan e marcadores fluorescentes (calceína-AM e etídio homodímero-1) foram</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">utilizadas para essa finalidade. O uso de MEM a 4ºC apresentou-se como o método</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">mais eficiente, possibilitando a preservação de percentuais de folículos viáveis com</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">ultraestrutura íntegra similares ao controle fresco por até 12 h. Na Fase II, avaliou-se a</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">eficiência dos crioprotetores dimetil sulfóxido, etileno glicol, glicerol e 1,3-propanodiol</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">para a criopreservação de FOPA caninos através de congelação lenta. Observou-se que</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">o dimetil sulfóxido (DMSO) na concentração de 1,5 M possibilitou a preservação dos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">maiores percentuais de FOPA viáveis e com ultra-estrutura intacta após a</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">descongelação. Na fase III, avaliou-se o efeito de soro anti-pZP sobre a viabilidade de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">FOPA caninos cultivados in vitro durante 24 h, e também sobre a ligação de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">espermatozóides caninos a óocitos homólogos. Utilizaram-se FOPA frescos ou</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">criopreservados com 1,5 M DMSO, que apresentaram resultados similares. Observou-se</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">que a adição de 10% de soro anti-pZP ao meio de cultivo não teve efeito sobre folículos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">com diâmetro inferior a 100 &#956;m em relação aos controles (ausência de soro ou adição de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">10% de soro pré-imune). Entretanto, o soro anti-pZP causou a atresia de FOPA com</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">diâmetros superiores a 100 &#956;m, conforme avaliado com calceína-AM e etídio</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">homodímero-1. Este soro a 10% mostrou-se capaz também de inibir a ligação de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">espermatozóides à zona pelúcida canina. Desta forma, demonstrou-se in vitro o</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">potencial do soro anti-pZP para a imunoesterilização (através da eliminação de FOPA) e</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">para a imunocontracepção (através do bloqueio da ligação de espermatozóides aos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">oócitos) de cães.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Palavras-chave: Imunocontracepção. Zona pelúcida. Folículos pré-antrais. Cães.</span></font></div><div style=""><br/></div>