ATIVIDADE ANTI-HELMÍNTICA SOBRE Haemonchus contortus E TOXICIDADE DO BENZOIL-CARVACROL: UM ESTUDO IN SILICO, IN VITRO E IN VIVO

• Ano de defesa: 2023
• Autor(a) principal: Braga, Andreza Pereira
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso embargado
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=111244

A resistência anti-helmíntica tem dificultado o controle de nematoides gastrintestinais de pequenos ruminantes. Alternativas terapêuticas utilizando metabólitos, como os monoterpenos presentes nos óleos essenciais de plantas, têm sido consideradas. O carvacrol é um monoterpeno com atividade anti-helmíntica promissora, porém tóxico. A modificação estrutural desse composto através da acetilação ou benzoilação pode melhorar suas propriedades farmacológicas e farmacocinéticas. Portanto, os objetivos deste estudo foram avaliar in silico e in vitro a atividade anti-helmíntica sobre Haemonchus contortus e a toxicidade in silico e in vivo do acetato de carvacrila (AC) e benzoil-carvacrol (BC). A avaliação in silico baseou-se no docking molecular do AC e BC contra a beta-tubulina, na dinâmica molecular (DM) para avaliar a estabilidade do melhor complexo receptor-ligante e na predição das propriedades de absorção, distribuição, metabolismo, excreção e toxicidade (ADMET). A eficácia anti-helmíntica do composto in silico com maior afinidade de ligação frente à beta-tubulina e com menor toxicidade foi avaliada in vitro nos ovos de H. contortus e sua toxicidade in vivo em ratos. O receptor beta-tubulina foi selecionado e preparado para realização das simulações de docking molecular com os ligantes AC, BC e tiabendazol (TBZ), este serviu de controle. As energias de afinidade frente à beta-tubulina de AC, BC e TBZ foram de -6.3, -8.0 e -6,3 kcal/mol, respectivamente. O BC apresentou o melhor valor para energia de afinidade frente à beta-tubulina. Foi observado também que BC se liga em um sítio diferente do TBZ. As simulações de DM demonstraram a estabilidade do complexo beta-tubulina/BC. Na farmacocinética preditiva, o BC apresentou maior estabilidade metabólica que o AC, indicando baixa toxicidade aguda por ativação metabólica (LD50 preditiva = 1.826 mg/kg e 1.525 mg/kg, respectivamente). Com base na triagem in silico, o BC foi selecionado para os testes in vitro e in vivo. Para tanto, o carvacrol foi submetido à benzoilação para obtenção de BC e analisado quimicamente por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa (CG/MS). A atividade anti-helmíntica do BC foi avaliada no teste de eclosão de ovos (TEO) utilizando um isolado de H. contortus multirresistente. Os resultados do TEO foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e comparados pelo teste Tukey (P<0,05) usando o software GraphPad Prism® 8.0.1. A concentração efetiva para inibir 50% da eclosão dos ovos (CE50) foi calculada no programa SPSS® 22.0. A estimativa da dose letal para 50% (LD50) dos ratos foi realizada utilizando o software AOT425StatPgm com dose limite de 2.000 mg/kg e valor sigma de 0,4. A análise por CG/MS confirmou a reação de benzoilação detectando o BC (78.91%) na amostra. No TEO, a CE50 de BC foi de 1,40 mg/mL. A DL50 de BC foi superior a 2.000 mg/kg. Conclui-se que a triagem virtual foi uma ferramenta valiosa para selecionar o BC e indicou sua afinidade pela beta-tubulina. Ademais, a atividade anti-helmíntica in vitro e a segurança toxicológica in vivo da forma benzoilada do carvacrol demonstrou seu potencial para ser testado em pequenos ruminantes.