USO DE POLÍMEROS SINTÉTICOS MELHORA A QUALIDADE DE FOLÍCULOS PRÉ- ANTRAIS CAPRINOS VITRIFICADOS E CULTIVADOS NO TECIDO OVARIANO

• Ano de defesa: 2017
• Autor(a) principal: VIZCARRA, DIEGO ALBERTO MONTANO
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Reprodução animal
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=84126

<div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">RESUMO</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">A vitrificação de tecido ovariano é uma alternativa para preservar a fertilidade de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">pacientes humanas que sofrem de câncer e que estão em risco de falência ovariana</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">prematura. No entanto, existe sempre a necessidade de aprimorar o protocolo existente</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">de vitrificação desse material biológico. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar se a</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">adição de polímeros sintéticos na solução de vitrificação afetou a morfologia e</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">desenvolvimento folicular, níveis de espécies reativas de oxigênio (ROS) e a expressão</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">de proteínas relacionadas à proliferação celular (Ki-67), presença de canais de água</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">(Aquaporina-3 ou AQP3) e apoptose (Caspase-3 ativada) no tecido ovariano da espécie</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">caprina, conhecida por ser um excelente modelo translacional para o ser humano. Para</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">isso, ovários caprinos foram obtidos de abatedouros locais e transportados ao laboratório</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">dentro de uma hora. Uma vez no laboratório, o córtex ovariano de cada par ovariano foi</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">cortado em pequenos fragmentos (n = 12; 1 x 1 x 0,5 mm) usando um Tissue Slicer®</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">(Thomas Scientific) em condições estéreis. Somente aqueles com um número</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">considerável de folículos pré-antrais foram considerados e distribuídos aleatoriamente</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">entre os grupos. Dois fragmentos frescos foram fixados em 4 % de paraformaldeído</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">(PAF) por 2 horas a 37 °C e denominados Controle Fresco, enquanto outros dois foram</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">cultivados in vitro por 7 dias e denominados Controle Cultivado. Os fragmentos restantes</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">(n = 8) foram distribuídos em quatro diferentes condições de vitrificação (2</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">fragmentos/condição): 1) Vitrificação com adição de sacarose; 2) Vitrificação com</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">adição de SuperCool X-1000 0,2%; 3) SuperCool Z-1000 0,4% ou 4) com PVP K-12</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">0,2%, totalizando quatro tratamentos experimentais. Todas as soluções de vitrificação</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">incluíam o antioxidante catalase. O Controle Cultivado e os tratamentos vitrificados</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">foram destinados para o cultivo in vitro por 7 dias. Morfologicamente, o tratamento com</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">SuperCool X-1000 não mostrou diferenças significativas em relação ao Controle Fresco</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">e foi superior em relação aos demais. Quanto ao desenvolvimento folicular, todos os</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">fragmentos vitrificados e cultivados in vitro mantiveram a percentagem de folículos em</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">desenvolvimento equivalente ao Controle Fresco, exceto no grupo vitrificado com</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">SuperCool Z-1000 que mostrou uma redução significativa na percentagem de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">desenvolvimento folicular após 7 dias de cultivo. No tocante à análise de proliferação,</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">somente o Controle Fresco mostrou células da granulosa marcadas positivamente para</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Ki-67. As marcações de AQP3 mais fortes foram encontradas no tratamento com</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Supercool X-1000 em todas as categorias foliculares avaliadas exceto para o</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">compartimento oocitário nos folículos secundários. A respeito da análise da caspase-3</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">ativada, não foram achadas diferenças estatisticamente significativas entre os</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">tratamentos. Os níveis de ROS foram iguais para todos os tratamentos cultivados. Em</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">conclusão, demonstrou-se que a vitrificação com o polímero sintético SuperCool X-1000</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">manteve amorfologia folicular semelhante à observada no tecido fresco, ou seja, folículos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">vitrificados com este polímero sintético podem resistir melhor o estresse sofrido durante</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">este processo. Assim mesmo, os resultados de ROS sugerem que a interação entre o</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">SuperCool X-1000 e o antioxidante catalase podem ajudar a reduzir o estresse oxidativo</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">que pode levar a injurias nos folículos ovarianos.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Palavras-chave: Tecido ovariano. Polímeros sintéticos. Cultivo in vitro. SuperCool X-</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">1000.</span></font></div>