Desenvolvimento e validação de método para quantificação do fármaco antimalárico cloroquina no plasma e passagem transplacentária em ratos

• Ano de defesa: 2021
• Autor(a) principal: Rolim, Thais de Sousa
• Orientador(a): Paumgartten, Francisco Jose Roma
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Link de acesso: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/49504

A cloroquina é uma 4-aminoquinolina usada para profilaxia e tratamento de malária desde 1947. Embora o uso extensivo e irracional tenha resultado na seleção de linhagens de Plasmodium falciparum resistentes à cloroquina, este fármaco ainda ocupa posição de destaque no arsenal terapêutico disponível para enfrentamento da malária, particularmente fora da África, em países onde os parasitas predominantes são o P.vivax, P.ovaleeP.malariae. A cloroquina e o seu derivado hidroxilado hidroxicloroquina integram a Lista de Medicamentos Essenciais da Organização Mundial da Saúde, e foram reposicionados para tratamento de condições inflamatórias e autoimunes como a artrite reumatoide, e o lúpus eritematoso, em virtude do moderado efeito imunossupressor. A amebíase hepática (mas não a intestinal) é outra indicação da cloroquina. A farmacocinética da cloroquina, ou seja a Absorção, Distribuição, Metabolização e Eliminação, foi estudada nos últimos 70 anos sendo em linhas gerais muito bem estabelecida. Algumas lacunas relativas à cinética desta 4-amino-quinolina antimalárica, entretanto persistem para serem devidamente preenchidas por estudos experimentais e clínicos. Entre estas, destacam-se afalta de investigações mais completas sobre a farmacocinética na gravidez e transferência materno-fetal do medicamento e metabólitos. A modulação dos parâmetros farmacocinéticos da cloroquina pela infecção (malária) e durante a evolução da gravidez é aspecto particularmente importante que não foi ainda abordado por estudos experimentais e clínicos. O objetivo do trabalho realizado no âmbito desta Dissertação foi desenvolver e validar método cromatográfico para quantificação da cloroquina no plasma, que possa ser empregado para estudo futuro das alterações farmacocinéticas desta 4-aminoquinolina na gravidez, incluindo a transferência através da placenta para o embrião-feto, e modulação destas alterações pela malária. O método analítico foi testado em diferentes colunas cromatográficas e composição de fase móvel em equipamento ShimadzuNexera XR. O sangue heparinizado foi submetido à separação do plasma. Esse material biológico foi testado com diferentes métodos de precipitação de proteínas para recuperação do analito no sobrenadante. A metodologia foi validada de acordo com a RDC 166/ 2017 da ANVISA. Para testar o desempenho do método desenvolvido neste trabalho, realizamos experimento preliminar sobre a passagem da cloroquina do sangue (plasma) materno para o fetal na gravidez a termo de ratas (dia 21 de gravidez) após administração oral (cânula gástrica) de dose única de 50 mg/kg de peso. Os resultados mostraram que as concentrações da cloroquina no plasma fetal, 120 min após o tratamento materno, correspondem a aproximadamente 70% dos níveis que foram registrados no plasma das mães. Essa extensa transferência materno-fetal é consistente com o que havia sido observado em alguns poucos estudo clínicos usando o sangue de cordão umbilical por ocasião do parto à termo. Em conclusão, um método para quantificação da cloroquina no plasma, sensível, robusto, e de baixo custo foi desenvolvido e validado e poderá ser empregado futuramente para estudos das alterações da cinética desse fármaco antimalárico causadas pela infecção e gravidez, incluindo a passagem através da placenta para o compartimento embrio-fetal.