Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: |
2020 |
Autor(a) principal: |
Chermont, Simone de Amorim |
Orientador(a): |
Delgado, Isabella Fernandes,
Jurgilas, Patrícia Barbosa |
Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
Tipo de documento: |
Dissertação
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Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
Idioma: |
por |
Instituição de defesa: |
Não Informado pela instituição
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Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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Departamento: |
Não Informado pela instituição
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País: |
Não Informado pela instituição
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Link de acesso: |
https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/54411
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Resumo: |
A leishmaniose visceral (LV) causada pelo parasito Leishamania chagasi é uma doença severa que se tornou um crescente problema de saúde pública em vários países, inclusive no Brasil. O diagnóstico de leishmaniose visceral canina (LVC) é muito importante no controle da doença, ao passo de evitar a eutanásia desnecessária de cães e a transmissão para os seres humanos. Atualmente o Ministério da Saúde (MS) preconiza o uso do ensaio imunoenzimático (EIE), como o teste confirmatório para leishmaniose visceral canina. Os kits EIE LEISHMANIOSE VISCERAL CANINA para o diagnóstico imunoenzimático indireto produzidos por Bio-Manguinhos utilizam imunoglobulina (Ig) de cabra anti-cão conjugada com peroxidase (HRP). Embora apresente melhor leitura e interpretação dos resultados quando comparado a outros testes sorológicos disponíveis comercialmente, este estudo visa otimizar os processos de conjugação a fim de tornar os resultados mais específicos, reprodutíveis e sensíveis, já que é produzido antes da produção do kit final. Foram produzidos quatro grupos de conjugados variando a estequiometria entre a IgG e HRP, o uso de técnica de purificação dos insumos e alteração do tempo reacional. Os conjugados produzidos foram avaliados por Cromatografia de por exclusão de tamanho (SEC) e por Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Os resultados mostraram uma melhor performance para os conjugados em que a imunoglobulina foi previamente purificada (forma monomérica) e utilizando a estequiometria de 0,2 moles de IgG:1 mol de HRP. Obtivemos bom resultado também diminuindo o tempo reacional, em relação ao conjugado utilizado atualmente. Conclui-se que a otimização do processo de conjugação entre a imunoglobulina e a peroxidase é essencial para melhorar a qualidade dos kits EIE LEISHMANIOSE VISCERAL CANINA de Bio-Manguinhos |