Pesquisa de IgG anti-formas epimastigotas fixadas de Trypanosoma cruzi por citometria de fluxo: otimização e análise de desempenho, aplicada ao diagnóstico e monitoração de cura da Doença de chagas.

• Ano de defesa: 2007
• Autor(a) principal: Matos, Christiane Santos
• Orientador(a): Martins Filho, Olindo Assis
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Link de acesso: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/20746

Um dos grandes desafios enfrentados por pesquisadores no c ampo da propedêutica sorológica complementar tem sido a busca d a melhor preparação antigênica para as aplicações no âmbito do imunodiagnóst ico de doenças infecto-parasitárias visando maior sensibilidade e especif icidade dos testes. Uma nova metodologia de pesquisa de IgG anti-formas e pimastigotas fixadas (FC-AFEA-IgG), baseada na citometria de fluxo, tem se mostrado um instrumento alternativo para o diagnóstico e monitora ção de cura da infecção crônica por Trypanosoma cruzi. Dando continuidade a esta investigação, o objetivo desse trabalho foi otimizar e avaliar os índice s de desempenho da FC- AFEA-IgG, principalmente no que se refere ao diagnóst ico sorológico da doença de Chagas. Neste estudo, foram selecionados um tot al de 255 indivíduos, dentre eles, 52 pacientes adultos cronicament e infectados por T. cruzi (CH) e 41 indivíduos não-infectados (NI) para avaliação da FC-AFEA-IgG no diagnóstico. Para a avaliação na monitoração de cur a pós-tratamento etiológico da doença de Chagas, foram analisadas 24 amo stras de soro de pacientes tratados curados (TC) e 17 amostras de soro de p acientes tratados, porém, não-curados (TNC). Adicionalmente, foram testad as 121 amostras de soro de indivíduos portadores de outras doenças infecto-p arasitárias: esquistossomose mansônica, malária, toxoplasmose, HLTV, HIV , Hepatite B, Hepatite C, sífilis, leishmanioses visceral e tegumentar. Todas as amostras foram submetidas a testes de sorologia convencional específ icos para o diagnóstico da doença de Chagas. Os resultados de otimiza ção demonstraram que alterações metodológicas relacionadas com a utilizaçã o de anticorpo secundário anti-Fc-IgG, a ampliação da faixa de diluiç ão das amostras-teste (1:16 a 1:32.768) e eliminação de ‘ debris’ pela utilização do corante vital azul de Evans para marcação dos parasitos, permitiram melhor d esempenho da FC- AFEA-IgG modificada quando comparada com a original. E m síntese, nossos resultados demonstraram que, empregando a diluição do soro 1:2.048 e o valor de 60% de PPFP como ponto de corte, o estudo da reat ividade sorológica de IgG anti-formas epimastigotas fixadas de T. cruzi aplica-se ao diagnóstico e à monitoração de cura pós-tratamento etiológico da do ença de Chagas com índices de sensibilidade e especificidade de 97,1% e 95, 4%, respectivamente.