Detecção de Histophilus somni (Haemophilus somnus) no sêmen bovino mediante reação em cadeia pela polimerase (PCR)
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Publication Date: | 2014 |
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Source: | Repositório Institucional da UNESP |
Download full: | http://dx.doi.org/10.7213/academica.12.01.ao01 http://hdl.handle.net/11449/133027 |
Summary: | The present study evaluated the use of PCR for Histophilus somni detection in bovine semen. Semen samples were experimentally infected with H. somni at dilutions ranging from 107 to 101 bacteria/mL and subjected to DNA extraction by the phenol/chloroform method, followed by PCR amplification. The amplification products were analyzed by electrophoresis in 8% acrylamide gel. The oligonucleotide primers used yielded an amplification fragment of 400 base pairs from the bacterial DNA. Positive amplification was obtained even for the 101 bacteria/mL dilution. PCR proved to be an efficient method for the detection of H. somni. The results obtained in this study have brought relevant information for the diagnosis of H. somni, justifying the need for the diagnosis of this bacterium in bulls, especially in semen samples that should be free of contamination. The PCR method has shown to be a useful tool for the quality control of semen produced in artificial insemination centers. |
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Detecção de Histophilus somni (Haemophilus somnus) no sêmen bovino mediante reação em cadeia pela polimerase (PCR)Detection of Histophilus somni (Haemophilus somnus) in bovine semen using polymerase chain reaction (PCR)CattleSemenHistophilus somniPCRBovinoSêmenHistophilus somniPCRThe present study evaluated the use of PCR for Histophilus somni detection in bovine semen. Semen samples were experimentally infected with H. somni at dilutions ranging from 107 to 101 bacteria/mL and subjected to DNA extraction by the phenol/chloroform method, followed by PCR amplification. The amplification products were analyzed by electrophoresis in 8% acrylamide gel. The oligonucleotide primers used yielded an amplification fragment of 400 base pairs from the bacterial DNA. Positive amplification was obtained even for the 101 bacteria/mL dilution. PCR proved to be an efficient method for the detection of H. somni. The results obtained in this study have brought relevant information for the diagnosis of H. somni, justifying the need for the diagnosis of this bacterium in bulls, especially in semen samples that should be free of contamination. The PCR method has shown to be a useful tool for the quality control of semen produced in artificial insemination centers.O presente estudo avaliou o uso da PCR para a detecção do Histophilus somni no sêmen bovino. Amostras de sêmen foram contaminadas experimentalmente com H. somni diluída em escalas de 107 a 101 bactérias/ mL, submetidas à extração de DNA pelo método de fenol/clorofórmio e amplificadas pela PCR. Os produtos da amplificação do DNA foram analisados por eletroforese em gel de acrilamida 8%. Por meio de oligonucleotídeos iniciadores obteve-se a amplificação de um fragmento de 400 pares de bases a partir do DNA da bactéria. Conseguiu-se amplificação positiva até na diluição de 101 bactérias/mL. A PCR mostrou-se eficiente na detecção de H. somni. O resultado disponibiliza conhecimento relevante para o diagnóstico de H. somni, justificando a necessidade do diagnóstico dessa bactéria em reprodutores, especialmente em amostras de sêmen, que deveriam estar livres de qualquer contaminação. A PCR mostrou-se como uma valiosa ferramenta no controle da qualidade do sêmen produzido em centrais de inseminação artificial.Universidade Federal de Tocantins (UFT), Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia, Araguaína, TO, BrasilUniversidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho (UNESP), Faculdade de Medicina Veterinária de Araçatuba (FMVA), Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal, Laboratório de Bioquímica e Biologia Molecular Animal, Rua Clóvis Pestana, 793, Jardim Dona Amélia, CEP 16050680, Araçatuba, SP, BrasilUniversidade Federal do Piauí (UFPI), Departamento de Clínica e Cirurgia Veterinária, Teresina, PI, BrasilUniversidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho (UNESP), Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV), Jaboticabal, SP, BrasilFundação de Medicina Tropical do Tocantins (Funtrop), Aguaína, TO, BrasilUniversidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho (UNESP), Faculdade de Medicina Veterinária de Araçatuba (FMVA), Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal, Araçatuba, SP, BrasilFaculdade de Ensino Superior da Amazônia Reunida (FESAR), Redenção, PA, BrasilUniversidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho (UNESP), Faculdade de Medicina Veterinária de Araçatuba (FMVA), Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal, Laboratório de Bioquímica e Biologia Molecular Animal, Rua Clóvis Pestana, 793, Jardim Dona Amélia, CEP 16050680, Araçatuba, SP, BrasilUniversidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho (UNESP), Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV), Jaboticabal, SP, BrasilUniversidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho (UNESP), Faculdade de Medicina Veterinária de Araçatuba (FMVA), Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal, Araçatuba, SP, BrasilUniversidade Federal de Tocantins (UFT)Universidade Estadual Paulista (Unesp)Universidade Federal do Piauí (UFPI)Fundação de Medicina Tropical do Tocantins (Funtrop)Faculdade de Ensino Superior da Amazônia Reunida (FESAR)Dias, Francisca Elda FerreiraNunes, Caris Maroni [UNESP]Cavalcante, Tânia VasconcelosSouza, Juliano Franco de [UNESP]Barbosa, Silvia MinharroCastro, Andréa Azevedo Pires deMoraes Jr., Felipe de Jesus [UNESP]Oliveira, Cláudia MarinovicGarcia, José Fernando [UNESP]2016-01-28T16:53:17Z2016-01-28T16:53:17Z2014info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/article11-16application/pdfhttp://dx.doi.org/10.7213/academica.12.01.ao01Revista Acadêmica: Ciências Agrárias e Ambientais, v. 12, n. 1, p. 11-16, 2014.0103-989Xhttp://hdl.handle.net/11449/13302710.7213/academica.12.01.ao01ISSN0103-989X-2014-12-01-11-16.pdf18923598712074089991374083045897Currículo Lattesreponame:Repositório Institucional da UNESPinstname:Universidade Estadual Paulista (UNESP)instacron:UNESPporRevista Acadêmica: Ciências Agrárias e Ambientaisinfo:eu-repo/semantics/openAccess2025-06-07T05:00:13Zoai:repositorio.unesp.br:11449/133027Repositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.unesp.br/oai/requestrepositoriounesp@unesp.bropendoar:29462025-06-07T05:00:13Repositório Institucional da UNESP - Universidade Estadual Paulista (UNESP)false |
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The present study evaluated the use of PCR for Histophilus somni detection in bovine semen. Semen samples were experimentally infected with H. somni at dilutions ranging from 107 to 101 bacteria/mL and subjected to DNA extraction by the phenol/chloroform method, followed by PCR amplification. The amplification products were analyzed by electrophoresis in 8% acrylamide gel. The oligonucleotide primers used yielded an amplification fragment of 400 base pairs from the bacterial DNA. Positive amplification was obtained even for the 101 bacteria/mL dilution. PCR proved to be an efficient method for the detection of H. somni. The results obtained in this study have brought relevant information for the diagnosis of H. somni, justifying the need for the diagnosis of this bacterium in bulls, especially in semen samples that should be free of contamination. The PCR method has shown to be a useful tool for the quality control of semen produced in artificial insemination centers. |
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